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年糕检测细菌总数方法步骤

检测报告图片样例

年糕检测细菌总数是评估其卫生质量与储存安全性的核心指标,依据 GB 4789.2-2022《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》执行。因年糕高水分、富营养的特性,易成为细菌(如大肠杆菌、腐败菌)滋生温床,细菌总数超标会导致年糕变质、引发肠胃不适,检测需通过标准化流程准确量化,保障食用安全。

检测前准备工作

试剂与材料准备

培养基:营养琼脂培养基(购买成品或按配方自制,成分含蛋白胨、牛肉膏、琼脂等,提供细菌生长所需营养),121℃高压蒸汽灭菌 20 分钟,冷却至 46℃备用;

稀释液:无菌生理盐水(0.85% 氯化钠溶液),121℃高压蒸汽灭菌 20 分钟,用于样品梯度稀释;

辅助材料:无菌培养皿、无菌移液管(1mL、10mL)、无菌均质袋,均需经 121℃高压蒸汽灭菌 30 分钟,确保无杂菌污染。

仪器设备准备

样品处理设备:无菌均质器(转速≥8000r/min,用于样品匀浆)、超净工作台(提供无菌操作环境);

培养与计数设备:恒温培养箱(精度 ±1℃,设定 36℃)、菌落计数器(或手动计数工具)、分析天平(精度 0.1g)。

检测核心流程(按国标 GB 4789.2-2022 执行)

样品取样与均质

无菌环境下,从年糕不同部位(表面、内部、边缘)随机取样 25g,快速放入含 225mL 无菌生理盐水的均质袋中,用无菌均质器拍打 1-2 分钟,制成 1:10 的样品匀悬液;

若样品质地坚硬,可先无菌切碎后再均质,确保样品与稀释液充分混合,细菌均匀分散。

梯度稀释

用 1mL 无菌移液管吸取 1:10 匀悬液 1mL,注入含 9mL 无菌生理盐水的试管中,涡旋振荡 30 秒,制成 1:100 的稀释液;

按相同方法依次稀释至 1:1000、1:10000.根据年糕污染预判选择 3 个适宜稀释度(如预包装年糕选 1:100、1:1000、1:10000.散装年糕选 1:10、1:100、1:1000)。

接种与培养

每个稀释度取 2 个无菌培养皿,分别注入 1mL 稀释液,随后倒入约 15mL 冷却至 46℃的营养琼脂培养基,轻轻旋转培养皿,使稀释液与培养基充分混匀,静置至培养基凝固;

将培养皿倒置放入 36℃恒温培养箱,培养 48 小时(避免冷凝水滴落污染菌落),同时做空白对照(仅接种无菌生理盐水,按相同流程培养)。

菌落计数

培养结束后,选取菌落数在 30-300CFU 之间的培养皿进行计数(菌落数过多或过少会影响结果准确性);

若同一稀释度的 2 个培养皿菌落数差值≤2 倍,取平均值计算;若差值>2 倍,需重新检测;空白对照需无菌落生长,否则检测结果无效。

结果计算与判定标准

结果计算

细菌总数(CFU/g)= 平均菌落数 × 稀释倍数;

示例:1:1000 稀释度的 2 个培养皿菌落数分别为 85、92.平均值 =(85+92)/2=88.5.细菌总数 = 88.5×1000=8.85×10⁴CFU/g。

判定标准(依据 GB 19295-2021《食品安全国家标准 速冻面米制品》及 GB 29921-2013《食品安全国家标准 食品中致病菌限量》):

预包装年糕(含速冻年糕):细菌总数≤1×10⁵CFU/g,符合要求则判定为合格;

散装年糕:细菌总数≤1×10⁶CFU/g,超出限值则判定为不合格,说明卫生状况不佳或已变质。

检测质量控制要点

无菌操作:全程在超净工作台进行,操作人员需洗手消毒、佩戴无菌手套,避免人为污染;

稀释准确性:移液管吸液、放液需规范,稀释液涡旋振荡充分,确保细菌均匀分布;

培养基质量:培养基灭菌后需检查是否凝固良好、有无杂菌污染,过期培养基禁止使用;

计数规范:菌落形态相似的合并计数,微小菌落需借助放大镜观察,避免漏计或误计。

年糕细菌总数检测以 “梯度稀释 - 接种培养 - 菌落计数” 为核心,按国标流程操作可准确量化卫生状况。严格把控无菌与稀释环节,能有效判断年糕是否合格,为食品安全管控提供关键技术支撑。

若你想了解不同类型年糕(如散装、速冻)的检测细节差异,或需要菌落计数的实操技巧,可随时告知,我会进一步补充!

检测流程步骤

检测流程步骤

温馨提示:以上内容仅供参考使用,更多检测需求请咨询客服。

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