茯苓检测真菌毒素是保障其食用与药用安全的关键环节，核心针对储存中易滋生的黄曲霉毒素、赭曲霉毒素 A 等致癌物，依据 GB 2761-2017、《中华人民共和国药典》(2020 年版一部)等标准执行。因茯苓基质含多糖、纤维等成分，需通过高效前处理去除干扰，搭配高灵敏度仪器分析，确保痕量毒素准确检出，规避健康风险。
检测前准备工作
试剂与材料准备：
标准品：黄曲霉毒素 B1/B2/G1/G2、赭曲霉毒素 A 标准储备液(100μg/mL，甲醇溶解，-20℃避光保存)，使用时用甲醇稀释成 0.1μg/L~10μg/L 系列标准工作液;
提取剂：甲醇 - 水混合液(体积比 7:3)，用于溶解真菌毒素;
净化材料：免疫亲和柱(黄曲霉毒素专用 / 多毒素复合柱，特异性吸附目标毒素，去除基质干扰);
辅助试剂：无水硫酸钠(脱水)、乙腈(色谱流动相，色谱纯)，实验用水为超纯水(电阻率≥18.2MΩ・cm)。
仪器设备准备：
样品前处理设备：高速冷冻离心机(转速≥10000r/min)、均质机(粉碎茯苓样品)、氮吹仪(浓缩样品液)、分析天平(精度 0.1mg);
分析仪器：高效液相色谱 - 荧光检测器(HPLC-FLD，常规检测*选，检出限 0.1μg/kg)、超高效液相色谱 - 串联质谱仪(UPLC-MS/MS，确证与痕量检测，检出限 0.01μg/kg)，检测前需用标准溶液校准，相关系数 R²≥0.999.
样品前处理步骤(关键除杂环节)
样品粉碎与称量：取茯苓样品去除杂质，用高速粉碎机粉碎后过 40 目筛，称取 25.00g 均匀样品于 50mL 离心管中，加入 50mL 甲醇 - 水提取剂;
提取与离心：涡旋振荡 10 分钟，超声提取 20 分钟(加速毒素溶出)，随后 10000r/min 离心 10 分钟，吸取上清液 20mL 至新离心管，加入 5g 无水硫酸钠脱水，静置 5 分钟;
净化与浓缩：取 10mL 脱水后的上清液，缓慢注入活化好的免疫亲和柱(用 5mL 甲醇、10mL 超纯水活化)，控制流速 1~2 滴 / 秒，待液体完全流出后，用 10mL 超纯水淋洗柱子，弃去淋洗液;用 5mL 甲醇洗脱目标毒素，收集洗脱液于氮吹管中;
定容待测：将洗脱液在 40℃氮吹仪中浓缩至近干，用甲醇 - 水混合液(体积比 1:1)定容至 1.0mL，过 0.22μm 有机相滤膜，同时做空白实验(不加样品，按相同流程处理)。
主流检测方法(分两类核心技术)
(一)高效液相色谱 - 荧光检测器法(HPLC-FLD，常规检测)
色谱条件设置：
色谱柱：C18 柱(250mm×4.6mm，5μm);
流动相：黄曲霉毒素检测用甲醇 - 乙腈 - 水(体积比 25:25:50)，赭曲霉毒素 A 检测用乙腈 - 水 - 冰醋酸(体积比 49:50:1);
流速：1.0mL/min，柱温 30℃，进样量 20μL;
荧光检测参数：黄曲霉毒素激发波长 365nm、发射波长 435nm(需衍生化时添加溴溶液)，赭曲霉毒素 A 激发波长 333nm、发射波长 477nm。
定量分析：依次进样系列标准工作液与样品液，记录峰面积，代入标准曲线计算毒素含量，若样品峰面积低于标准曲线较低浓度峰面积，判定为 “未检出”。
(二)超高效液相色谱 - 串联质谱法(UPLC-MS/MS，确证与痕量检测)
仪器条件设置：
色谱柱：C18 超高效柱(100mm×2.1mm，1.8μm);
流动相：甲醇 - 0.1% 甲酸水溶液(梯度洗脱：0~3min 甲醇 30%→70%，3~5min 保持 70%);
质谱条件：电喷雾离子源(ESI+)，多反应监测模式(MRM)，黄曲霉毒素 B1 定量离子对 313.1→285.1.赭曲霉毒素 A 定量离子对 404.1→358.1.碰撞能量分别为 25eV、30eV。
定性与定量：
定性：样品中目标毒素的保留时间与标准品偏差≤2%，定性离子对相对丰度比符合国标要求;
定量：采用外标法，按定量离子对峰面积计算毒素含量，适用于低含量样品确证与多毒素同步检测。
结果判定与质量控制
结果判定：
黄曲霉毒素：总量≤10.0μg/kg，其中 B1≤5.0μg/kg(GB 2761-2017);赭曲霉毒素 A≤5.0μg/kg(《药典》要求);
若检测结果<方法检出限，判定为 “未检出”;若≥检出限但≤限量，判定为 “合格”;若>限量，判定为 “不合格”，需启动风险管控。
质量控制要求：
空白实验：空白溶液中不得检出目标毒素，否则需更换试剂、清洗仪器;
加标回收实验：取阴性茯苓样品添加 0.5μg/kg、1.0μg/kg 标准品，回收率需在 80%~120% 之间;
平行样检测：每批次样品做 2 份平行样，相对偏差≤10%，确保结果重复性。
茯苓真菌毒素检测以 “免疫亲和柱净化 + 仪器分析” 为核心，HPLC-FLD 适用于常规检测，UPLC-MS/MS 用于痕量确证。严格把控前处理与质量控制，能准确检出有害毒素，为茯苓安全应用提供技术支撑。
若你想了解多毒素同步检测方案，或需要具体仪器的操作参数细则，可随时告知，我会进一步补充!
检测流程步骤
温馨提示：以上内容仅供参考使用，更多检测需求请咨询客服。
